Екстракт листя Engelhardia Roxburghiana DHQвиробник
Екстракт листя Engelhardia Roxburghiana дигідрокверцетинце дигідрофлавонолова сполука, яка міститься в багатьох рослинах. Крім синтетичного дигідрокверцетину на ринку, основним природним джерелом є модрина. Досліджуючи листя Astragalus membranaceus, наша компанія виявила, що натуральне листя Astragalus membranaceus також містить дигідрокверцетин. Оскільки ресурси модрини стають дедалі дефіцитнішими, відкриття нашої компанії може значно знизити вартість виробництва дигідрокверцетину та забезпечити найбільш економічно ефективні дигідрокверцетинові продукти на ринку.
Будучи найбільшим виробником дигідрокверцетину в Китаї, KINTAI має два основні технологічні шляхи для отримання дигідрокверцетину: біосинтез і екстракція. Дигідрокверцетин, який ми зараз виробляємо, в основному видобувається з модрини, а деякі витягуються з листя вовчої ягоди. Біосинтез ось-ось увійде в пілотне виробництво, і після його завершення ви отримаєте високоякісні та недорогі продукти дигідрокверцетину. Нижче ми в основному представляємо поточний процес екстракції нашої компанії з використанням листя вовчої ягоди та методу синтезу біосинтезу. Якщо вас цікавить додаткова інформація, будь ласка, зв’яжіться з нами, щоб отримати більш професійні відповіді.
KINTAI Процес екстракції дигідрокверцетину з жовтого листя вовчої ягоди
Наше виробництво використовує багатоетапний процес для забезпечення чистоти та високої якостіЕкстракт листя Engelhardia Roxburghiana DHQ.
Обробка сировини: Виберіть свіжі жовті листя вовчої ягоди, видаліть домішки та наріжте їх, щоб забезпечити повне вивільнення активних інгредієнтів у подальшому процесі екстракції.
Екстракція та концентрація:Використовуйте 80% розчин етанолу для двох екстракцій зі зворотним холодильником. Додайте 6-кратну кількість етанолу в перший раз і 5-кратну кількість етанолу вдруге, щоб забезпечити ефективну екстракцію активних інгредієнтів з жовтого листя вовчої ягоди. Екстракт концентрують при зниженому тиску для видалення етанолу для забезпечення безпеки продукту.
Очищення колонковою хроматографією:Використовуйте макропористі адсорбційні смоли, такі як D101, AB-8 і NKA-II для подальшого розділення та очищення. Процес елюції проходить добре, для елюції використовується 70% розчин етанолу. Екстракт прозорого кольору.
Кристалізація:Завдяки точному концентруванню розчинника та процесу охолодження утворюються світло-жовті голчасті кристали дигідрокверцетину.
Гідроліз:Екстракт гідролізують і перекристалізовують для отримання дигідрокверцетину високої чистоти з вмістом 95,7%-96.5%.
ВЕРХ-хроматограмний аналіз
У процесі виробництва весь дигідрокверцетин перевіряється за допомогою високоефективної рідинної хроматографії для забезпечення високої чистоти та ефективності продукту. Як показано на малюнку, точний аналіз хроматограми ВЕРХ показує вміст дигідрокверцетину.
COA& Звіт про аналіз рідинної хроматографії DHQ
Останні дослідження kintai щодо синтезу дигідрокверцетину
Наша дослідницька група нещодавно зробила важливий прорив у вивченні мікробного синтезу дигідрокверцетину
Дигідрокверцетин є важливою флавоноїдною сполукою, яка широко використовується в продуктах харчування, медицині та сільському господарстві завдяки своїй антиоксидантній, протизапальній, протипухлинній та іншій фізіологічній активності. Однак традиційні методи екстракції рослин обмежені сезонами, географічними умовами та постачанням сировини, що призводить до високих витрат виробництва та нестабільного виробництва. Тому використання мікроорганізмів для гетерологічного синтезу дигідрокверцетину стає привабливим варіантом.
Мікробний синтез може не тільки уникнути цих вузьких місць екстракції рослин, але також має такі переваги, як короткий виробничий цикл, низькі екологічні вимоги та простий контроль якості. Однак через обмеження таких факторів, як регуляція метаболізму, як ефективно досягти синтезу дигідрокверцетину в мікроорганізмах залишається серйозною проблемою. Завдяки скринінгу ключових ферментів, розробці промоторів, багатокопійній інтеграції та метаболічному перепрограмуванню ми значно покращили виробництво дигідрокверцетину та забезпечили ефективний спосіб його промислового виробництва.
Скринінг та оптимізація ключових ферментів F3'H і F3H
Процес синтезу дигідрокверцетину базується на каталізі двох ключових ферментів, F3'H і F3H. F3'H каталізує гідроксилювання (2S)-нарінгеніну в положенні C-3' флавоноїдного скелета з утворенням (2S)-ериодиктіолу; F3H перетворює (2S)-нарінгенін в дигідрокемпферол. Щоб покращити виробництво дигідрокверцетину, ми перевірили три F3'H і п'ять F3H з різних рослин. Після експериментів було виявлено, що SmF3'H і CsF3H мали найкращий каталітичний ефект, утворюючи (2S)-ериодиктіол і дигідрокемпферол з виходами 254,1 мг/л і 173,4 мг/л відповідно. Тому ми вибрали ці два ферменти для подальшої оптимізації синтезу.
Оптимізація промоутерських проектів
Для подальшого покращення експресії SmF3'H і CsF3H ми запровадили інженерію промотора та оптимізували рівні експресії цих ключових ферментів. Шляхом скринінгу промоторів різної сили було виявлено, що коли SmF3'H і SmCPR експресувалися під контролем промоторів PGAL1 і PGAL10, титр (2S)-ериодиктіолу був найвищим, досягаючи 382,1 мг/л. Подібним чином ми значно збільшили виробництво дигідрокемпферолу, регулюючи експресію CsF3H і використовуючи промотори різної сили, такі як PTDH1, PGAL7 і PSSA1. Ця оптимізація показує, що шляхом підвищення рівня експресії ключових ферментів ефективність синтезу цільових метаболітів може бути ефективно покращена.
Інтеграція кількох копій покращує вихід
Для подальшого вдосконалення виробництва дигідрокверцетину ми застосували технологію інтеграції генів із кількома копіями. Шляхом інтеграції копії гена шляху синтезу дигідрокверцетину в багатокопійний сайт Ty2 Saccharomyces cerevisiae ми успішно отримали високопродуктивний штам FQ26ty, титр дигідрокверцетину якого досяг 71,4 мг/л. Кількісний аналіз генів показав, що число копій генів SmF3H, SmF3'H і SmCPR коливалося від 2,87 до 3,44, що вказує на те, що багатокопійна інтеграція гена значно посилює виробництво дигідрокверцетину. Крім того, шляхом подальшої інтеграції більшої кількості копій генів шляху синтезу ми сконструювали штам серії FQE-D і успішно збільшили виробництво дигідрокверцетину до 74,5 мг/л. Цей результат доводить, що збільшення кількості копій ключових генів синтетичного шляху є ефективною стратегією збільшення виходу цільових продуктів.
Перепрограмування метаболізму та оптимізація вуглецевого обміну
Окрім оптимізації ключових ферментів та інтеграції генів, ми також метаболічно перепрограмували систему метаболізму вуглецю Saccharomyces cerevisiae для подальшого збільшення виробництва дигідрокверцетину. Спочатку ми представили гени, пов’язані зі шляхом PAL, включаючи AtPAL2, AtC4H, AtATR2 і ScCYB5, і отриманий штам FQ27 досяг продукції дигідрокверцетину 87,8 мг/л. Згодом ми додатково підвищили врожайність до 103,9 мг/л шляхом надлишкової експресії ключових генів ARO1/2/3 шляху шикімату та гена EcAROL, отриманого з E. coli. Крім того, ми також запровадили гетерологічний фосфокетолазний шлях, щоб тісно зв’язати центральний вуглецевий метаболізм із синтезом еритрозо-4-фосфату, а потім отримали штам FQ29 з продукцією дигідрокверцетину 107,5 мг/л.
Оптимізація надходження НАДФН та альфа-кетоглутарату
F3'H потребує споживання NADPH під час каталітичного процесу, тоді як F3H вимагає -кетоглутарат як ко-субстрат. Тому, щоб збільшити надходження цих двох ключових речовин, ми посилили експресію таких генів, як TYR1 і ZWF1, щоб збільшити надходження NADPH. Експерименти показують, що спільна експресія TYR1 і мутантного BDH1* збільшує вироблення дигідрокверцетину на 20,2%, досягаючи 175,8 мг/л. Крім того, надмірна експресія ARO8 додатково сприяла виробленню -кетоглутарату, в результаті чого вироблення дигідрокверцетину досягло 206 мг/л. Нарешті, шляхом надекспресії IDH1 ми отримали високопродуктивний штам FQ38 з виходом 235,1 мг/л.
Розвідка промислового виробництва
На основі оптимізації в лабораторних масштабах ми додатково провели експерименти з періодичної ферментації в 5-літровому біореакторі. Додавши 5 г/л CaCO3 під час процесу бродіння, ми успішно збільшили титр дигідрокверцетину до 873,1 мг/л протягом 114 годин, встановивши новий рекорд виробництва.
Підводячи підсумок, ми значно покращили ефективність мікробного синтезу дигідрокверцетину за допомогою систематичної метаболічної інженерії та оптимізації процесу бродіння. Це дослідження не тільки створює технічну основу для промислового виробництва дигідрокверцетину, але також є еталонним для мікробного синтезу інших вторинних метаболітів рослин.
Різноманітні додатки
Дієтичні добавки
Функціональне харчування
Косметика
Співпрацюйте з нами для успіху
В епоху, коли здоров’я та благополуччя знаходяться в центрі уваги, DHQ є лідером у прагненні до довголіття, життєвої сили та загального здоров’я. Як найбільший постачальник екстрактів модрини DHQ у Китаї, Kintai є вашим улюбленим партнером для високоякісних натуральних рішень для підтримки вашого здоров’я та благополуччя.Якщо ви хочете купувати якісніЕкстракт листя Engelhardia Roxburghiana, зв’яжіться з нами за адресоюsales@kintaibio.comабо відгук на наступній сторінці.
Популярні Мітки: Engelhardia roxburghiana екстракт листя, Китай Engelhardia roxburghiana екстракт листя виробники, постачальники, фабрика
